目的:观察载体蛋白偶联的TSO45-4B抗原FnⅢ结构域相应的线性B细胞表位肽诱导的体液免疫反应。方法:人工合成TSO45-4B抗原FnⅢ结构域2条预测表位肽,偶联钥孔血蓝蛋白免疫小鼠,采用ELISA法检测小鼠血清中预测表位肽特异性抗体滴度。结果:免疫小鼠血清中检测到1条预测表位肽特异性抗体,其效价达到1∶1 280。结论:设计的1条TSO45-4B抗原FnⅢ结构域线性B细胞表位肽可诱导小鼠产生体液免疫反应。

目的:克隆结核分枝杆菌减毒株H37Ra培养滤液蛋白10(CFP10)基因,并对其进行序列分析。方法:自结核菌H37Ra株抽提基因组DNA为模板,以已知结核菌H37Ra株CFP10基因设计引物。通过聚合酶链反应(PCR)技术扩增出结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因,将其克隆至pTG19-T载体后,经PCR和双酶切鉴定后进行DNA序列测定,并以BLAST在线软件进行序列比对分析。结果:PCR产物电泳显示扩增片段约为300 bp,测序获得的片段开放编码框由303 bp组成,与H37Rv株CFP10基因同源性为100%,推导出编码氨基酸序列同源性为100%。结论:成功克隆结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因,其基因序列与H37Rv株CFP10基因序列无差异。

目的:观察间日疟现症患者外周树突状细胞(dendritic cells,DC)亚群比例的的变化,探讨DC亚群在间日疟发病机制中的作用。方法:采用流式细胞术四色荧光分析法检测18例间日疟现症患者(疟疾组)和36名健康成人(对照组)外周血的浆细胞样DC(PDC)和髓样DC(mDC)的比例。结果:疟疾组患者PDC明显低于对照组(P0.01),mDC/PDC明显高于对照组(P0.01),而mDC在2组间无明显不同(P0.05)。结论:间日疟现症患者机体呈现免疫抑制状态,间日疟原虫与DC相互作用,可能通过调整mDC/PDC的比值参与间日疟感染的Th1型免疫应答的诱导和调控。

目的:探讨无创双水平气道正压通气(bi-level positive airway pressure,BiPAP)在低氧高碳酸血症治疗中的临床应用价值。方法:选择62例低氧血症或者同时合并高碳酸血症的患者,分别为慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)和阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS),分为A组和B组,根据患者具体情况实施治疗措施,其中A组32例进行无创BiPAP,B组呼吸兴奋剂治疗。观察2组心率、呼吸频率和血气分析的变化情况。结果:A组低氧血症或者同时合并高碳酸血症的症状得到改善,1例改为气管插管有创机械通气。B组4例需气管插管有创机械通气,1例多器官衰竭病死。A组治疗后心率、呼吸频率和血气分析均优于B组(P0.01)。结论:无创BiPAP能够改善患者的低氧血症和高碳酸血症,降低心率和呼吸频率,缓解病情,临床效果显著,是一种简便、有效、安全、可靠且易被患者接受的治疗方法。

目的:探讨困难性胆囊切除术后胆管损伤及术后残余胆囊的原因及防范措施。方法:回顾性分析564例困难性胆囊切除术后有胆管损伤及术后残余胆囊的27例患者临床资料。结果:胆管损伤15例(2.66%),治愈13例,好转1例,病死1例。残余胆囊12例(2.13%),4例术后治愈;2例结石复发,拒绝手术;6例无结石者未手术,好转出院。结论:困难性胆囊切除术后胆管损伤及术后残余胆囊的发生率较高,正确的手术时机及细致的手术操作应能避免严重的手术并发症。

目的：克隆间日疟原虫醛缩酶(Plasmodium vivax aldolase，PvALD)基因，体外表达和鉴定重组PvALD蛋白。方法：PCR法从间日疟患者血液DNA样品中扩增PvALD基因，构建pET32c-PvALD重组表达质粒，转化大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3+)，诱导表达带有His标签的重组蛋白，并对PvALD在E.coli中表达进行优化，观察诱导时间、诱导剂浓度、培养基种类对该蛋白原核表达的影响。采用镍柱亲和层析纯化重组蛋白，相应表达物分别采用SDS-PAGE电泳和Western blot进行分析鉴定。结果：PvALD的PCR产物分子量为1.1 kb，重组质粒pET32c-PvALD经测序验证，其插入片段序列与GenBank参考序列相似性为100%，转化E.coli所表达的重组蛋白分子量约为60 kD。PvALD在LB中1 mmol/L IPTG诱导6 h条件下获得最佳的表达效果。亲和层析纯化后的PvALD经SDS-PAGE电泳检测，呈现单一条带，Western blot分析结果显示，该重组蛋白只能被间日疟患者血清特异性识别，而不能被恶性疟患者血清识别。结论：成功克隆了PvALD基因，表达了重组PvALD蛋白，为以PvALD作为靶标的间日疟快速诊断方法提供了基础。

目的:探讨建立简便有效的大量制备鼠伯氏疟原虫蛋白的方法。方法:采集伯氏疟原虫感染晚期的大鼠外周血经肝素抗凝,通过白细胞滤器过滤去除白细胞,再使用30%阿拉伯胶溶液经密度梯度离心法分离含虫红细胞,经皂素溶血,收集纯化的原虫,虫体经超声波破碎后离心,上清液经SDS-PAGE电泳分析。采用蛋白凝胶灰度扫描方法分析蛋白电泳条带的分布。结果:从大鼠含虫外周血可分离制备出大量的可溶性疟原虫蛋白,对大鼠分离的疟原虫可溶性蛋白与小鼠来源的原虫可溶性蛋白比较,两种蛋白的电泳图谱完全相同。结论:利用大鼠模型可简便高效地制备大鼠伯氏疟原虫,结合超声波破碎法可提取足量的可溶性疟原虫蛋白抗原。

目的：比较磷酸化抗原(HDMAPP)、结核杆菌耐热抗原(Mtb-HAg)和结核杆菌低分子耐热抗原Mtb-HAg(10k)刺激外周血T细胞产生-干扰素(IFN-) 的反应能力方面的特点及差异。方法：采集正常人外周血，分别用HDMAPP、Mtb-HAg和Mtb-HAg(10k)刺激培养14h,再加入莫能霉素继续培养6 h，收集细胞，加入荧光标记单抗进行表面分子和胞内染色，然后在流式细胞仪上检测各实验组中CD3+细胞和CD3+细胞胞内IFN-的表达。结果：正常人各抗原实验组CD3+细胞和CD3+ 细胞胞内产生IFN-+细胞比率较阴性组对照组升高(P0.01)。各抗原刺激组CD3+ 细胞产生IFN-+细胞比率明显高于CD3+细胞(P0.05~P0.01)。3种抗原刺激组间CD3+细胞和CD3+细胞无明显不同(P0.05)。结论：HDMAPP、Mtb-HAg和Mtb-HAg(10k)均可以刺激外周血中T细胞中和 细胞群产生IFN-，均可特异性诱导刺激CD3+细胞产生IFN-，HDMAPP、Mtb-HAg(10k)对CD3+细胞产生IFN-的表达量高于Mtb-HAg。

目的探讨噻托溴铵吸入剂对稳定期D组慢性阻塞性肺疾病（COPD）病人临床症状、肺功能及其生活质量的改善作用。方法选取92例稳定期D组（按GOLD 2018分组）COPD病人为研究对象，依据随机数字表法分为观察组（n=46）和对照组（n=46）。对照组行肺功能锻炼及布地奈德/福莫特罗吸入治疗，观察组在对照组基础上联合噻托溴铵吸入剂治疗，治疗6个月后比较2组病人6 min步行距离（6MWD）、肺功能（FEV1、FVC）、临床症状评分（CAT）、呼吸困难程度（mMRC评分）、生活质量（SGRQ评分）。结果2组病人FEV1、FVC治疗后较治疗前均改善，观察组高于对照组（P < 0.01）；2组6MWD均较治疗前改善，且观察组高于对照组（P < 0.01）；治疗后2组病人CAT、mMRC、SCRQ评分均减少，观察组改善优于对照组（P < 0.01）。结论肺功能锻炼联合噻托溴铵及布地奈德/福莫特罗治疗稳定期D组COPD病人能有效改善病人的临床症状及肺功能，提高病人的生活质量。